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熒光分光光度計(jì)操作規(guī)程
更新時(shí)間:2018-01-26 點(diǎn)擊次數(shù):15765

1. 開機(jī)

a. 確認(rèn)所測(cè)試樣液體或固體,選擇相應(yīng)的附件。

b. 先開啟儀器主機(jī)電源,預(yù)熱半小時(shí)后啟動(dòng)電腦程序RF-530XPC,儀器自檢通過后,即可正常使用。

2. 測(cè)樣

(1) spectrum模式

a. 在“Acquire Mode”中選擇“Spectrum”模式。

· 對(duì)于做熒光光譜的樣品,“Configure”中“Parameters”的參數(shù)設(shè)置如下:

“Spectrum Type”中選擇Emission;給定EX波長(zhǎng);給定EM的掃描范圍(zui大范圍220nm—900nm);設(shè)定掃描速度;掃描間隔;狹縫寬度,點(diǎn)擊“OK”完成參數(shù)的設(shè)定。

· 對(duì)于做激發(fā)光譜的樣品,“Configure”中“Parameters”的參數(shù)設(shè)置如下:

“Spectrum Type”中選擇Excitation;給定EM波長(zhǎng);給定EX的掃描范圍(zui大范圍220nm—900nm);設(shè)定掃描速度;掃描間隔;狹縫寬度,點(diǎn)擊“OK”,完成參數(shù)的設(shè)定。

b. 在樣品池中放入待測(cè)的溶液,點(diǎn)擊“Start”,即可開始掃描。

c. 掃描結(jié)束后,系統(tǒng)提示保存文件??稍?ldquo;Presentation”中選擇“Graf” “Radar” “Both Axes Ctrl+R”來調(diào)整顯示結(jié)果范圍;在“Manipulate” 中選擇“Peak Pick”來標(biāo)出峰位,zui后在“Channel”中進(jìn)行通道設(shè)定。

d. 述操作步驟對(duì)固體樣品同樣適用。

(2) Quantitative模式

a. 在“Acquire Mode”中選擇“Quantitative”模式。

b. “Configure”中“Parameters”的參數(shù)設(shè)置如下:

Method 選擇“Multi Point Working Curve” ;“Order of Curve” 中選擇 “1st和“No” ;給定EX、EM波長(zhǎng);設(shè)定狹縫寬度,點(diǎn)擊“OK”,完成參數(shù)的設(shè)定。

c. 在樣品池中放入裝有空白溶液的比色皿后執(zhí)行“Auto Zero” 命令校零點(diǎn)。

d. 點(diǎn)擊“Standard”模式,制作工作曲線。

e. 將樣品池中的空白溶液換成一系列的已知濃度的樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)量,執(zhí)行“Read”命令,得到相應(yīng)的熒光強(qiáng)度,系統(tǒng)根據(jù)測(cè)量值自動(dòng)生成一條“熒光強(qiáng)度-濃度”曲線。

f. 在“Presentation” 中選擇“Display Equation”,得到標(biāo)準(zhǔn)方程。將此工作曲線 “Save”為擴(kuò)展名為“.std”的文件。

g. 工作曲線制備完畢,即可進(jìn)入未知樣的測(cè)量,選擇進(jìn)入“Unknown”模式,將樣品池中的已知濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液換成待測(cè)樣品溶液,執(zhí)行“Read”命令,即可得到相應(yīng)的熒光強(qiáng)度和相應(yīng)的濃度。將此 “Save”為擴(kuò)展名為“.qnt”的文件。

(3) Time Course模式

a. 在“Acquire Mode”中選擇“Time Course”模式。

b. “Configure”中“Parameters”的參數(shù)設(shè)置如下:

給定EX、EM波長(zhǎng);設(shè)定狹縫寬度;設(shè)定反應(yīng)時(shí)間;讀取速度;讀取點(diǎn)數(shù);

點(diǎn)擊“OK”,完成參數(shù)的設(shè)定。

c. 在樣品池中放入裝有空白溶液的比色皿后執(zhí)行“Auto Zero” 命令校零點(diǎn)。

d. 將樣品池中的空白溶液換成待測(cè)溶液,點(diǎn)擊“Start”,即可開始掃描。掃描結(jié)束后,即可得到熒光強(qiáng)度對(duì)時(shí)間的工作曲線。

e. 將此工作曲線“Save”為擴(kuò)展名為“.TMC”的文件。

3. 關(guān)機(jī)

退出軟件后關(guān)畢主機(jī)。

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